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搜索结果: 1-13 共查到核酸生物化学 PCR相关记录13条 . 查询时间(0.187 秒)
2022年6月15日,安光所刘勇研究员、朱灵研究员团队研发的“数字PCR生物芯片阅读仪”正式获得安徽省药品监督管理局二类医疗器械注册证(皖械注准20222220135)。这是安徽省首款获批上市的数字PCR产品,填补了我省数字PCR自主产品的空白。该仪器获得医疗器械注册证,为下一步临床推广应用奠定了基础。
近日,病毒病预防控制所利用新型一步巢式荧光定量PCR技术(OSN-qRT-PCR)研制成功高灵敏新型冠状病毒核酸检测试剂盒,检测新型冠状病毒的ORF1ab和N基因。该试剂盒在湖北省疾病预防控制中心完成临床标本的初步评价,OSN-qRT-PCR相较于荧光定量PCR,检出率提高,特异性良好。相关结果发表在Analytical Chemistry。
介绍一种从不同类型细胞或不同生长状态细胞中分离差异表达基因的快速高效mRNA差异显示技术,其特点是利用Ready-To-Go RT-PCR反应珠和Ready-To-Go RAPD分析珠进行mRNA差异显示分析,使取样步骤降至最低程度,减少了潜在的取样误差和外源DNA污染,并确保每次反应的高度重复性.通过银染测序胶分析差异显示的cDNA带,便于DNA回收和进一步克隆.用此方法分析人胚发育早期不同阶段...
摘要 采用两步 PCR法成功地克隆了一个全长的 c DNA.首先 ,用差式分析法克隆得到差别表达的 c DNA片段 ,再分别用这些片段内部的特异序列及 c DNA两端不同接头的序列为引物进行第一步 PCR扩增 ,得到差别 c DNA片段的上游和下游序列 .然后 ,根据第一步 PCR扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步 PCR,从而得到全长的 c DNA. ...
摘要 为构建含较多大片段的高质量的老年性白内障消减cDNA文库 ,利用生物素标记、磁珠分离的改良消减杂交法获得差异cDNA .利用选择性PCR法扩增其中大片段差异cDNA ,将其与T 载体进行T A连接并转化入大肠杆菌 ,成功构建老年性白内障消减cDNA文库 .共获得 4 0 0 0余个克隆 ,随机挑取的 2 2个克隆中 ,≥ 10 0 0bp的片段有 7个 ,占 31 8% ,≥ 75 0bp有...
摘要 PCR SSCP是对未知单核苷酸多态性 (SNPs)进行检测最简便、最实用的方法之一 .该方法检测的灵敏度易受片段大小的影响 .以大小在 2 0 0bp左右的PCR扩增产物为检测对象 ,对该方法的影响因素进行了分析 .结果表明 ,在 4℃条件下 ,10V cm恒压电泳 10~ 16h ,在上样缓冲液中加入10 %甘油 ,在 12 %~ 15 %的非变性聚丙烯酰胺 (arc∶bis =2 9∶...
摘要 建立竞争性 PCR方法 ,以期用于转录水平基因表达的定量研究 .以检测大鼠颅骨骨细胞总RNA中骨形态发生蛋白 - 2 ( BMP- 2 ,bone morphogenetic protein- 2 ) m RNA含量为例 ,构建大鼠BMP- 2基因的竞争模板 ,以之为内对照进行竞争性 PCR.PCR反应结束后 ,电泳、拍照 ,扫描所扩增条带密度 ,作回归方程 .根据回归方程 ,计算出正常 7...
摘要 采用激光微切割与定量PCR技术,分析使用不同提取方法从不同固定方法固定的病理切片中提取的RNA.用70%乙醇、丙酮、甲醇、4%多聚甲醛固定肾脏冰冻切片,使用激光微切割技术切取肾小球,用硫氰酸胍方法(guanidinethiocyanatemethods,GTC)和Trizol试剂方法提取RNA,使用Taqman定量PCR方法分析比较各组RNA的量;选取丙酮固定的石蜡切片,使用激光微切割技术切...
PCR检测伪狂犬病病毒DNA     伪狂犬病病毒  DNA检测  PCR       2007/12/19
摘要 根据伪狂犬病病毒 (PRV)gB基因的序列 ,设计并合成了一对引物 ,以闽A株细胞培养毒为模板 ,筛选最佳反应条件 ,建立了检测PRV的PCR方法 应用该方法对Fb、Bartha、BJ、GD、V2F4、S、S3、SR、Buk、Shope、Norden、MinkⅢ、HB、F8、F9、F12等毒株的细胞培养液进行基因扩增 ,均获得了分子量为 2 81bp的特异性目的DNA片段 ,而对Vero细...
摘要 介绍一种用PCR方法鉴定重组体中插入片段的正、反连接方向及其是否导入细胞的方法.其原理是选择紧靠载体克隆位点上游的一段序列为上游引物,以扩增插入序列的上、下游引物分别作为下游引物进行PCR.载体上游引物加插入序列的上游引物可扩出产物者为反向连接;加插入序列的下游引物可扩出产物者为正向连接.该法简单、快速,可广泛用于鉴定重组体中插入片段的正、反连接方向及基因转染时外源基因是否导入细胞内. ...
摘要 描述了一种快速、有效的cDNA文库筛选策略。其主要过程是将cDNA文库重组子进行矩阵排列,进而用特异引物进行PCR逐级筛选以分离目的基因.
摘要 利用RT-PCR技术分离低密度脂蛋白受体基因cDNA,将长为2605bp的cDNA插入质粒pJN6,并经全序列测定证实,该序列与已报道序列相比,存在两个变异碱基,即第754位C→T,和1654位的G→A,这两个变异碱基并不改变编码的氨基酸,利用LDL受体基因cDNA中的ClaⅠ片段作为探针,检测到LDL受体基因上外显子8的StuⅠ位点是个限制性片段长度多态性位点。所克隆的cDNA含有可译框架...
在分子生物学实验中,如PCR产物与载体连接、测序等,需要对PCR产物进行纯化。目前许多公司都开发出试剂盒,但其价格比较贵。作者根据十六烷基三甲基溴化铵 (hexadecyltrimethyl ammonium bromide, CTAB)与核酸相结合的特性,利用它进行PCR产物纯化,所得的纯化产物可以用于与T载体连接,提高连接效率。

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