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检测已构建的缺氧反应元件（hypoxia response element,HRE）和人端粒酶催化亚单位(human telomerase reverse transcriptase，hTERT）启动子调控CDX2基因表达的载体pLVX-5HRE-hTERTp-CDX2-3FLAG(5HhC)对人结肠癌细胞系LoVo增殖的影响。方法：复苏前期筛选的转染pLVX-hTERTp-CDX2-3FLAG(...
构建靶向人大肠癌细胞端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）基因的RNAi载体，探讨其对人大肠癌SW480细胞增殖的影响。方法：设计3条靶向hTERT的shRNA序列和阴性对照序列，分别克隆入pGPU6/GFP/Neo载体，构建RNAi载体pGPU6-hTERT-1、2、3和阴性对照载体pGPU6-hTERT-NC，转染SW480 ...
hTERT|CEA及CMV启动子在人结肠癌细胞株中的转录活性比较
结肠肿瘤 转录启动子 转染
2014/4/28
比较人端粒酶催化亚单位（hTERT），癌胚抗原（CEA）及巨细胞病毒（CMV）启动子在人结肠癌细胞株LoVo和SW480中的转录活性。 方法：设计引物应用PCR法从人结肠癌基因组中克隆hTERT和CEA启动子；用双酶切和PCR法切除原始载体pLVX-EGFP-3FLAG中的CMV启动子后，将hTERT，CEA启动子与该载体重组，构建出重组质粒pLVX-hTERTp-EGFP-3FLAG和pLVX-...
pEGFP-hTERT转染鸡胚胎干细胞建系的研究
pEGFP-hTERT hTERT基因 BRL-CM 鸡胚胎干细胞
2014/9/26
本研究旨在通过构建重组质粒pEGFP-hTERT转染鸡胚胎干细胞(Chicken embryonic stem cells，cESCs)，优化鸡胚胎干细胞培养体系，以期构建鸡胚胎干细胞株或细胞系。在获得hTERT基因后，构建重组质粒pEGFP-hTERT，并利用FuGENE@HD转染鸡成纤维细胞(DF-1)，转染24 h后，荧光显微镜检测；再以80% BRL-CM（大鼠肝细胞条件培养基）与20% ...
探讨腹腔镜胃癌根治术患者外周血及腹腔冲洗液中hTERT mRNA的表达及其临床意义。方法 临床上将胃癌根治术分为腹腔镜组和开腹组两组，各30例，应用RT-PCR方法检测两组患者术前、术后外周静脉血及腹腔冲洗液人端粒酶亚单位hTERT mRNA的表达，探讨腹腔镜胃癌根治术患者外周血胃癌微转移的情况及对腹腔脱落癌细胞的影响。结果 Ⅲ期胃癌患者外周静脉血中的hTERT mRNA阳性率明显高于Ⅰ期、Ⅱ期(...
外源hTERT基因转染对老年大鼠供肝缺血再灌注损伤的防护作用
hTERT基因 缺血再灌注损伤 肝移植 老年大鼠
2013/8/27
研究老年大鼠与成年大鼠肝脏缺血再灌注损伤的程度；在肝移植前将外源端粒酶逆转录酶(TERT)基因导入老年大鼠供肝内，移植成功后观察该基因对老年大鼠供肝缺血再灌注损伤的影响。方法 Wistar大鼠共分为2组：Ⅰ组为成年大鼠(5个月)，Ⅱ组为老年大鼠(16~18个月)。移植成功后，检测ALT、维生素C和维生素E含量，超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)及丙二醛(MDA)含量，比较两组缺血再...
研究hTERT基因反义寡核苷酸(ASODN)对瘢痕疙瘩成纤维细胞生长增殖及端粒酶活性的抑制作用，探讨其在瘢痕疙瘩治疗中的作用。方法 应用ASODN封闭瘢痕疙瘩成纤维细胞hTERT基因的表达，不同浓度不同时间以ASODN作用于体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞，细胞计数和MTT法检测成纤维细胞生长增殖情况，端粒酶PCR-ELISA法检测不同处理浓度和时间成纤维细胞端粒酶活性。结果 ASODN作用于瘢痕疙瘩...
研究靶向hTERT基因的重组质粒pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA对人结直肠癌SW480细胞裸鼠移植瘤的治疗作用。 方法： 于裸鼠右侧腋下皮下注射人结直肠癌SW480细胞建立结直肠癌移植瘤动物模型，随机分为生理盐水组（NS组）、pGPU6/GFP/Neo-NC-shRNA组（NC-shRNA组）和pGPU6/GFP/Neo-hTERT-shRNA组（hTERT-shRNA组），各组...
目的 研究多西紫杉醇和顺铂联合应用对人乳腺癌MCF 7细胞的作用及其机制。方法 MCF 7细胞传代培养后分组加药第1组加入多西紫杉醇(多西紫杉醇组);第2组加入顺铂(顺铂组);第3组加入多西紫杉醇和顺铂(联合用药组);对照组为未加药的MCF 7细胞。加药24、48、72h后收集细胞,MTT法检测各组细胞生长抑制率， PCR ELISA法检测各组细胞端粒酶活性，RT PCR法检测端粒酶逆转录酶hTE...
结肠癌中hTERT的表达及其与Survivin和bcl-2表达的关系
结肠肿瘤 端粒酶逆转录酶 Survivin bcl-2
2011/10/17
目的：研究端粒酶逆转录酶(hTERT)在结肠癌中的表达及其与Survivin和bcl-2表达的关系。方法：应用免疫组织化学SABC法检测52例结肠癌及其相应癌旁正常组织中hTERT、Survivin和bcl-2的表达。结果：52例结肠癌组织中hTERT表达阳性率为80.8%，而相应癌旁正常结肠组织中无一例阳性表达。hTERT表达的上调与患者性别、年龄、肿瘤浸润深度无明显相关(P>0.05)，而与肿...
结肠癌中hTERT和P53蛋白表达及临床意义
结肠肿瘤 hTERT P53
2012/6/29
研究结肠癌中hTERT和P53表达情况、意义及两者之间的相互作用关系。方法 应用免疫组织化学SABC法检测52例结肠癌及其相应癌旁正常组织中hTERT和P53的表达。结果 52例结肠癌组织中hTERT表达阳性率为80.8%(40/52)，而相应癌旁正常结肠组织中无1例阳性表达；52例结肠癌组织中阳性表达为38例，阳性率为73.1%(38/52)，相应癌旁正常结肠组织中同样无1例阳性...
腺病毒介导的shRNA沉默hTERT基因表达对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的影响
RNA干扰 腺病毒载体 hTERT基因 NPC细胞
2013/12/25
探讨靶向人端粒酶反转录酶（hTERT)的短发夹RNA（shRNA)对人鼻咽癌细胞株CNE-2 hTERT表达的影响，及其对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的效应。方法构建表达绿色荧光蛋白(EGFP)基因和靶向hTERT基因短发夹RNA的重组腺病毒质粒，观察其对鼻咽癌细胞株(CNE-2)的转染效果，RT-PCR检测hTERT mRNA表达水平，Western blot检测hTERT蛋白表达水平，CCK-8法检测...
观察人端粒酶逆转录酶基因（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）启动子驱动的肿瘤抑素(tamstatin)基因在肝癌细胞HepG2内特异性表达及其体外抗血管形成的作用。方法: 构建phTERT-tumstatin、pCMV-tumstatin（阳性对照）、phTERT-EGFP（阴性对照）质粒，脂质体介导转染HepG2肝癌细胞、L-02正常肝...
靶向hTERT基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定
肠肿瘤 RNA干扰 慢病毒属 hTERT
2012/5/23
构建hTERT基因RNAi慢病毒载体,为大肠癌RNAi介导的基因治疗打下基础。方法 化学合成3条靶向hTERT基因的siRNA，转染大肠癌细胞SW480，48 h后采用RT-PCR方法筛选出一条对hTERT mRNA有明显抑制作用的siRNA。针对已经筛选确定的hTERT基因RNAi有效靶序列，合成靶序列的Oligo DNA，退火形成双链DNA，与经XhoⅠ和Hpa Ⅰ酶切后的GP-Supersi...