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利用CRISPR/Cas9系统定向改良水稻稻瘟病抗性
水稻 CRISPR/Cas9 Pita Pi21 ERF922 稻瘟病抗性
2019/10/24
【目的】CRISPR/Cas9基因编辑技术是作物遗传改良的有效工具。本研究通过对水稻Pita、Pi21和ERF922稻瘟病相关基因进行定点编辑，以期获得能够稳定遗传的抗稻瘟病水稻材料。【方法】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，以Pita、Pi21和ERF922为靶基因，构建共编辑载体pC1300-2×35S::Cas9-gPita-gPi21-gERF922 ，用农杆菌转化长粒粳稻恢复系L1...
SCIENCE CHINA Life Sciences（中国科学：生命科学英文版，SCLS）近日在线发表了我所王克剑团队和中国科学院遗传与发育生物学研究所李家洋团队、高彩霞团队的合作研究论文“Robust genome editing of CRISPR-Cas9 at NAG PAMs in rice”，报道了CRISPR-Cas9系统可以高效编辑水稻中含有前间区序列邻近基序（PAM）为NAG的...
利用CRISPR/Cas9系统定向编辑水稻SD1基因
CRISPR/Cas9 基因编辑 水稻 半矮秆基因
2018/7/6
【目的】半矮秆水稻品种的选育和应用是水稻育种的最重大成果之一。半矮秆品种大多是半矮秆基因SD1(semi-dwarf1)功能缺失突变体，为了获得sd1突变体，本研究对SD1基因进行了定向编辑。【方法】利用CRISPR/Cas9系统，以SD1基因为靶基因，构建基因编辑载体CRISPR-SD1，用农杆菌介导的方法转化水稻恢复系申繁17和申繁24。【结果】在2个转化受体的T0代均获得了纯合的sd1突变体...
CRISPR/Cas9系统编辑水稻Wx基因
水稻 CRISPR/Cas9系统 Wx 基因编辑 直链淀粉含量
2018/3/15
【目的】直链淀粉含量与稻米品质密切相关。Wx基因是控制水稻直链淀粉合成的主效基因，通过对Wx基因定点编辑以获得稳定遗传、直链淀粉含量适宜的突变体。【方法】构建CRISPR/Cas9表达载体pGK03-Wx-gRNA (靶点1和2分别在Wx基因第1和第2外显子)，利用工程菌EHA105遗传转化超级稻楚粳27，潮霉素筛选获得转化株系，对转化株系及其后代进行分子检测、测序、基因表达和遗传稳定性分析以及直...
利用CRISPR/Cas9系统定向改良水稻粒长和穗粒数性状
CRISPR/Cas9 基因编辑 水稻 GS3 Gn1a
2018/2/1
【目的】基因组定点编辑技术已成为分子育种的重要手段。本研究拟对GS3和Gn1a功能缺失突变对目标性状的改良效应进行分析，以期为培育高产水稻提供理论基础。【方法】利用CRISPR/Cas9系统，以控制粒型基因GS3和控制每穗粒数基因Gn1a为编辑对象，构建了共敲除载体pC1300-2×35S::Cas9-gGS3-gGn1a，用农杆菌介导法转化4个优质水稻品种，分析了基因突变的特征和相应农艺性状。【...
以水稻OsbHLH116 基因为编辑对象，根据基因编码区序列（CDS）在第一外显子区域设计长度为19 bp的sgRNA，化学合成sgRNA的寡核苷酸序列，然后与CRISPR/Cas9系统表达载体pBUN411连接，再用农杆菌介导法获得水稻转基因株系，最后利用酶切和测序相结合的方法对OsbHLH116 突变体进行了筛选鉴定和脱靶效应分析。结果表明，所构建的pBUN411gRNA载体成功实现了对基因...